注意豬場用水安全！水蛭可以攜帶非洲豬瘟病毒達140天！

發布日期：2019-11-14 09:56:08 來源：互聯網

近日，最新發表在著名國際期刊《Veterinary Microbiology》上的一項研究發現，非洲豬瘟病毒在水蛭體內存活可達140天。
 

已有研究表明，ASFV可通過水源傳播。截止目前，水被ASFV污染的源頭仍不清楚，其中一個可能的因素是感染豬的糞便和尿液。然而，在沒有合適寄生物的情況下，ASFV在水中存活時間一般只有數天，是不可能在水中長期存在的。因此，尋找可以攜帶和傳播非洲豬瘟病毒的水生生物顯得非常必要。在自然環境中，水蛭是細菌、病毒、寄生蟲的重要宿主。早在1913年，Boynton等已發現它在牛瘟的傳播中具有重要作用。后續研究也發現，水蛭是動物病毒的跨宿主傳播的載體之一。該研究對水蛭攜帶和分泌ASFV的能力進行了檢測，并對水蛭分泌的ASFV的感染能力進行了分析。

實驗分組

將水蛭分為兩組。第一組的96條水蛭進行ASFV的攜帶研究。在豬感染ASFV 6天左右，讓水蛭在感染豬的下腹部吸食血液，因為這個時期血液中的病毒載量相對較高。通過人為摘除，控制水蛭的吸食時間為10 min左右。同時用10條吸食過人血液的水蛭作為實驗對照。第二組的96條水蛭用來進行ASFV的培養研究。將感染豬的脾臟提取物進行稀釋后，以4.0 lg HADU??/ml ASFV的濃度對該組水蛭進行飼喂。同時用10條未進食的水蛭作為實驗對照。模擬夏季的環境溫度，該研究中水蛭的培養條件為22℃–25℃ 80天，26℃–32℃ 60天，24℃–26℃ 60天。

實驗結果

表2  非洲豬瘟病毒在水蛭中的存在

通過檢測水蛭的體液分泌物，該研究確認了兩組的水蛭均攜帶了ASFV。在無水蛭的水環境對照中，HADU檢測結果顯示，ASFV在培養液中的失活與溫度密切相關。30℃避光條件下，ASFV可至少存活12-14天，最長可達30-35天 （1A）。PCR結果顯示，ASFV DNA在水環境中可存在至少3-5周（1B）。在水蛭實驗組，HADU結果顯示，直到160天，有50%的水蛭體內仍可檢測到ASFV（表2）。HADU結果顯示，我們發現實驗開始階段血液吸食組水蛭體內的病毒含量高于脾臟提取物培養組。60-80天后，血液吸食組水蛭體內的病毒含量開始下降，但一直持續至160天左右（1C）。PCR方法與HADU方法的結果基本一致，ASFV DNA在血液吸食組水蛭體內可存在150-160天，在脾臟提取物培養組水蛭體內可存在140-150天（1D）。在水蛭實驗組的培養液中，雖然ASFV滴度隨培養時間延長有所下降，但直到實驗結束，通過HADU和PCR方法均能檢測到ASFV的存在（1E和1F）。另外，結果顯示培養液沉淀物中的病毒拷貝數要明顯高于培養液。
 

為了測試水蛭攜帶ASFV的感染能力，培養130-160天后，該研究用水蛭實驗組的培養液、水蛭提取物的10倍稀釋液對豬原代肺泡巨噬細胞進行感染。HADU和PCR結果均顯示，接種后24-48 h病毒滴度明顯增加。
 

該研究進一步測試了水蛭實驗組攜帶的ASFV是否對豬具有感染能力，結果表明水蛭攜帶的ASFV通過口服途徑感染豬是可能的，但是這種現象不能被有規律的重復，特別是在實驗的后期階段。從口服感染到發病，豬的潛伏期為12-15天，這與臨床數據非常相似。
 

該研究表明，在相對比較高的溫度條件下，水蛭體內的ASFV可存活達140天?？梢酝茰y，如果在相對低的溫度條件下，該存活期可能會更長。根據這個發現，我們認為水蛭也是ASF流行的一個重要宿主。該發現對于放養豬和野豬的ASF季節性流行的原因，也提供了一個合理解釋。目前，水蛭可使病毒長時間保持感染力的原因還不清楚，Al-Khleif等認為水蛭體內可能存在一些適合病毒生存的因子。病毒能夠在水蛭體內存活并分泌到環境中，可能的原因是病毒能夠在水蛭的組織細胞、未消化的血液中復制，或者水蛭組織細胞具有長期保存病毒的能力，并緩慢釋放。然而，ASFV不太可能在水蛭攝取的血液中進行復制，因為兩組間的病毒滴度接近。水蛭生長的水中能檢測到ASFV，可能原因是它的分泌或排泄，該研究認為水蛭可能在維持ASFV病毒活性方面具有重要作用。

譯者的話：

2018年8月3日，我國發現首例非洲豬瘟疫情，隨后很快傳播到全國大部分地區，已經造成巨大的經濟損失。由于缺乏安全有效的疫苗，目前控制該病的唯一方法是實行嚴格的生物安全措施。因此，對ASFV的傳播途徑進行深入研究，有助于提高生物安全防控意識，增強防控手段。水蛭作為多種細菌、病毒、寄生蟲的重要宿主，在疫病傳播中具有不可忽視的作用。筆者認為，本研究關于水蛭可攜帶ASFV的發現，揭示了ASFV可在水中長期存在的一個重要原因。研究發現，水源是ASFV跨區域傳播的一個重要因素，美國堪薩斯州立大學Niederwerder助理教授的研究小組發現，ASFV通過飲水引起感染的劑量很小，最低僅為100 TCID??。我國地域遼闊，地理環境復雜，物種種類多樣。已有相關數據表明，1959-2009年我國大陸的人體水蛭病病例數達1003例，主要分布于廣西、貴州、云南、福建、廣東、湖北、江西、浙江等15個省（區）。目前雖然沒有發現水蛭與ASFV在我國迅速傳播的直接聯系，但根據該研究提供的數據，我們應該提高警惕，重視養豬用水的凈化，同時加強周邊河流的監管，禁止死豬入河，共同構筑堅實的生物安全屏障。

https://doi.org/10.1016/j.vetmic.2019.108421